琼脂扩散板怎么配制（琼脂扩散试验注意事项）
摘要：
本篇目录：1、营养琼脂的配制2、琼脂凝胶免疫扩散(AGID)试验具体怎样操作和判定结果?... 本篇目录：
营养琼脂的配制
琼脂和水的比例是1：10，300x10=3000毫升=3000g，所以300毫升的水配置3000g的营养琼脂。
加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶，122摄氏度高压灭菌15分钟 如用于菌落计数，琼脂量为百分之5；如作成平板或斜面，则应为百分之2。
使用琼脂配制培养基。是需要加热煮沸的。只有这样。琼脂才可以溶解在液体之中。 具体操作方法如下：配方：PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）：马铃薯200克(用浸出汁)，葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升，pH值自然。
既可以购买已经配置好的营养琼脂干粉（登分中已经把需要的各种成分配制好），也可以自己通过按比例量取需要的成分，混合在一起。
用蒸馏水配制而成，调节pH为2±0.2，经121℃压力蒸汽灭菌后使用。本培养基营养丰富，对某些较难生长的细菌均能生长，可用于各种细菌的增殖培养，亦可用作基础培养基。
琼脂凝胶免疫扩散(AGID)试验具体怎样操作和判定结果?
沉淀反应法常见的是一种琼脂扩散试验。单向扩散是利用不同抗原抗体在琼脂中不同的扩散速度而会在琼脂中出现几条相互分离的沉淀带。
溶化琼脂糖，在水平桌上将溶化的琼脂糖倒在预复琼脂玻板上，制成厚度约3～4mm厚的琼脂糖凝胶板，待冷却后根据所需形状打孔（注意不宜在室温下放置过久，尽量缩短操作时间，以免干燥）。
单向免疫扩散在含有特异抗体的琼脂板中打孔，并在孔中加入定量的抗原，当抗原向周围扩散后与琼脂中抗体相结合，即形成白色沉淀环，其直径或面积与抗原浓度呈正相关。
琼脂扩散法是怎样的?
K-B纸片琼脂扩散法原理：将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上。纸片中所含的药物吸取琼脂中的水分溶解后不断地向纸片周围区域扩散形成递减的梯度浓度。
琼脂扩散法是一种常用的免疫学实验技术，用于单克隆抗体浓度的定量和抗原抗体相互作用的检测。
k-b纸片琼脂扩散法原理：k-b纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成一种浓度梯度。
gel diffusion test） 可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂凝胶内扩散，二者相遇，在比例合适处形成白色沉淀。基本类型有单向扩散和双向扩散两种。
琼脂扩散法是用琼脂凝胶为扩散介质。琼脂凝胶法测软膏剂体外释药速率的原理是软膏剂是药物不适宜基质均匀混合制成的外用半固体剂型，基质占软膏的绝大部分，除起赋形剂的作用外，还对软膏剂的质量起重要作用。
琼脂糖凝胶怎么配制
1、（1）称取琼脂糖1g，加入10倍电泳缓冲液10mL，再加入蒸馏水90mL，在电炉上加热溶解，配制成1%琼脂糖凝胶，稍凉后加入配好的EB溶液数滴。（2）将电泳模板两端密封，倒入琼脂糖凝胶溶液，插入梳子。
2、可以**，配置琼脂糖胶时，可以使用蒸馏水和高浓度的TAE液。
3、配料准备 首先需要准备琼脂糖和水两种基本配料。一般情况下，按照1%的浓度配制琼脂糖凝胶，即每100mL水中加入1g琼脂糖。溶解琼脂糖 将适量的水加热至沸腾，然后慢慢加入琼脂糖。
4、琼脂糖凝胶的配制是分子实验室比较基本的操作，因此正确地操作对整个实验来讲很有必要，大体流程如下：称量、熔胶、倒胶、拔梳。
5、制备琼脂糖凝胶的方法如下：首先称取0.7 g (0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中，加入70 ml (50 ml) 1×TAE，然后瓶口倒扣小烧杯，将其放入微波炉中加热煮沸3次，直至琼脂糖全部融化。
6、制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml，小胶用50ml)：称取0.7 g(0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶中，加入70 ml(50ml)1×TAE，瓶口倒扣小烧杯.微波炉加热煮沸3次至琼脂糖全部融化，摇匀，即成0%琼脂糖凝胶液。
1.单项琼脂扩散试验有哪些影响因素?
1、⑴配抗菌药物原液前要清楚抗菌药物原粉的百分含量、批号和生产厂家。⑵配制抗菌药物原液时，可能会遇到抗菌药物难溶的现象，这就要求用相应的助溶剂溶解。⑶抗菌药物原液的终体积要用容量瓶定容。
2、影响纸片法药敏试验结果的因素有：1培养基的质量，如pH、深度、硬度和表面湿度等。
3、管碟法中扩散系数、扩散时间因素会影响抗生素在琼脂表面的扩散。管碟法是测定抗生素效价的方法之一，是国内外常用的方法，药典微生物检定法也一直采用管碟法。
4、检查时的禁忌：禁忌暴饮暴食，和剧烈运动，适宜在早晨空腹检测。检查时要求：试验前应做预试验，确定抗体的稀释度。加样时不要将琼脂划破，以免影响沉淀线的形成。加样时不同浓度抗体和抗原不要混淆，影响试验结果。
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